清華劉萬里課題組發(fā)文報(bào)道自身免疫疾病相關(guān)的調(diào)控B淋巴細(xì)胞活化和分化新機(jī)制

清華新聞網(wǎng)10月9日電 10月4日，清華大學(xué)生命學(xué)院劉萬里課題組在《科學(xué)》（Science）期刊發(fā)表題為《自身免疫病相關(guān)IgG1變異體調(diào)控B細(xì)胞活化及分化》的研究論文，報(bào)道人類膜聯(lián)免疫球蛋白IgG1重鏈胞內(nèi)區(qū)存在增加系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）易感性的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（SNP），并揭示該SNP參與調(diào)控B細(xì)胞命運(yùn)決定的新機(jī)制。

SLE是最常見的自身免疫疾病之一，以產(chǎn)生多種自身抗體、免疫復(fù)合物沉積并累及多器官為臨床表現(xiàn)，造成一系列并發(fā)癥，其發(fā)病機(jī)制至今尚不清楚，導(dǎo)致治療手段有限且無法根治。因此探究SLE的發(fā)病機(jī)制一直是基礎(chǔ)免疫學(xué)和風(fēng)濕免疫病學(xué)關(guān)注的重點(diǎn)和難點(diǎn)。B淋巴細(xì)胞是抗體免疫應(yīng)答的核心效應(yīng)細(xì)胞。在生理?xiàng)l件下，其通過分泌防護(hù)性抗體來清除入侵機(jī)體的病原體，從而保護(hù)人體的健康，并且留給人體記憶性免疫力。然而，在病理?xiàng)l件下，具有自身反應(yīng)性的B細(xì)胞在被異常激活后能夠分泌識(shí)別自身抗原的抗體，這些自身抗體進(jìn)而對(duì)自身組織進(jìn)行攻擊并引起抗體介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，對(duì)機(jī)體造成損害。具有自身反應(yīng)性的IgG型記憶性B細(xì)胞在人體中廣泛存在，而且SLE等自身免疫疾病常伴隨大量自身抗體的產(chǎn)生。

基于上述兩點(diǎn)事實(shí)，劉萬里課題組提出IgG型B細(xì)胞受體（IgG-BCR）的異常活化可能參與到SLE等自身免疫病的發(fā)病過程中這一猜想。通過與北京大學(xué)人民醫(yī)院牽頭、北京大學(xué)深圳醫(yī)院和北京大學(xué)第一醫(yī)院參與的北大醫(yī)學(xué)風(fēng)濕免疫病學(xué)專業(yè)的合作研究，劉萬里團(tuán)隊(duì)和栗占國(guó)團(tuán)隊(duì)共同發(fā)現(xiàn)人類膜聯(lián)免疫球蛋白IgG1重鏈基因IGHG1上的SNP（rs117518546）在SLE患者中顯著增加，該SNP導(dǎo)致人類膜聯(lián)免疫球蛋白IgG1第396位甘氨酸突變?yōu)榫彼幔↖gG1-G396R）。

SLE易感基因突變IgG1-G396R改變Grb2在免疫突觸中的招募方式

進(jìn)一步的臨床指標(biāo)相關(guān)性分析表明，攜帶該SNP的SLE患者產(chǎn)生更多更廣泛的IgG1型的自身抗體，發(fā)生炎癥反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)增加，疾病活動(dòng)指數(shù)也更高，揭示該SNP為新的SLE易感基因位點(diǎn)。劉萬里團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步利用該SNP的基因敲入小鼠，發(fā)現(xiàn)在自身免疫誘導(dǎo)模型中，攜帶該SNP的小鼠產(chǎn)生更多、更廣泛的自身抗體，而這依賴于B細(xì)胞受抗原刺激后大量自身反應(yīng)性漿細(xì)胞的分化。與此同時(shí)，劉萬里團(tuán)隊(duì)探索了該SNP對(duì)正常疫苗接種激發(fā)的抗體應(yīng)答的影響，發(fā)現(xiàn)該SNP的純合型攜帶者的流感病毒特異性IgG1抗體應(yīng)答顯著高于未攜帶該SNP的健康志愿者。

這一結(jié)果表明，該SNP對(duì)調(diào)控IgG型B細(xì)胞介導(dǎo)的抗體應(yīng)答的具有典型的“雙刃劍”效應(yīng)：一方面促進(jìn)機(jī)體中能識(shí)別非我抗原的防護(hù)性抗體的產(chǎn)生，幫助機(jī)體抵御病原體入侵；另一方面在免疫系統(tǒng)異常的情況下，促進(jìn)識(shí)別機(jī)體自我抗原的記憶性B細(xì)胞產(chǎn)生自身抗體，加劇SLE的發(fā)生和發(fā)展。

在分子機(jī)理層面的研究中，劉萬里團(tuán)隊(duì)發(fā)揮其實(shí)驗(yàn)室多年來的研究特色，整合高速高分辨率活細(xì)胞單分子成像平臺(tái)和單分子軌跡追蹤算法，揭示該SNP顯著延長(zhǎng)IgG-BCR活化后招募的下游信號(hào)分子Grb2在B細(xì)胞免疫突觸中的駐留時(shí)間。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)揭示該SNP突變通過形成新的激酶-底物間的氨基酸殘基相互作用，顯著增強(qiáng)了Lyn激酶結(jié)構(gòu)域與ITT基序的結(jié)合，進(jìn)而極大的促進(jìn)了Lyn對(duì)ITT基序的磷酸化效率，從而延長(zhǎng)了Grb2在免疫突觸中的停留時(shí)間，更有效促進(jìn)Grb2-BTK-PLCγ2信號(hào)小體在免疫突觸中的形成，促進(jìn)B細(xì)胞免疫活化后向分泌抗體的漿細(xì)胞分化的命運(yùn)決定。

本論文從疾病易感基因位點(diǎn)的臨床遺傳學(xué)研究出發(fā)，開展大樣本多中心臨床相關(guān)性分析，再到基于基因修飾小鼠的動(dòng)物模型研究，和基于新型成像技術(shù)和常規(guī)生化分析的受體活化信號(hào)通路解析，最后到基于分子動(dòng)力學(xué)模擬的蛋白互作面的三維結(jié)構(gòu)研究。這一系列的研究結(jié)果加深了人們對(duì)SLE易感基因位點(diǎn)功能及致病機(jī)理的認(rèn)識(shí)，為SLE研究提供了全新的研究靶點(diǎn)，也為復(fù)雜疾病相關(guān)易感基因位點(diǎn)的研究提供了創(chuàng)新性的研究模式。

值得一提的是，該研究發(fā)現(xiàn)了在以漢族人為代表的東亞人群中廣泛存在，但在歐美人種中極少存在的SLE易感SNP，為在中國(guó)罹患SLE的近百萬患者，提供精準(zhǔn)醫(yī)療的潛在靶點(diǎn)和理論支持，具有重大的潛在的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，是書寫在祖國(guó)大地上的研究成果。

清華大學(xué)生命學(xué)院2018年1月份已畢業(yè)的陳相軍博士為論文第一作者，清華大學(xué)生命學(xué)院和免疫學(xué)研究所劉萬里研究員為論文通訊作者，北京大學(xué)人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科栗占國(guó)教授為論文的共同通訊作者。

劉萬里課題組長(zhǎng)期致力于使用新型的高速高分辨率的活細(xì)胞單分子熒光成像技術(shù)，結(jié)合傳統(tǒng)的分子免疫學(xué)、生物化學(xué)和生物物理學(xué)研究手段，對(duì)B淋巴細(xì)胞免疫識(shí)別、免疫活化及相關(guān)免疫疾病的致病機(jī)理進(jìn)行研究。2011年到清華獨(dú)立工作以來，以通訊作者（含共同）在《細(xì)胞》《白血病》《科學(xué)免疫學(xué)》《美國(guó)科學(xué)院院報(bào)》等知名期刊上發(fā)表多篇論文。

論文鏈接：

http://science.sciencemag.org/content/early/2018/10/03/science.aap9310

    供稿：生命學(xué)院 編輯：華山  審核：襄楠